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人乳头瘤病毒感染患者的实验室检测方法与临床干预策略

临床研究

2022-09-23      

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FOCUS ON IVDCHINA

作者:廖淑蓉  杨斌  

单位:1.北京凯普医学检验实验室,2.中国中医科学院西苑医院病理科   

人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus, HPV)是一种无包膜的、结构为双链闭合环状的小分子DNA病毒,属于多孔病毒科乳头瘤病毒属,由一个二十面体包绕的衣壳蛋白组成基因组,由L1和L2两个结构蛋白构成,直径大约55nm[1]。  

HPV侵犯人体后停留于感染部位的皮肤和黏膜中,并进行增殖,不进入血液,不产生毒血症。至今已鉴定出100多种HPV基因型,经常用HPV-1、HPV-2表示,将近33%的基因型与与生殖道损伤有关[2]。在目前已经可以检测出与人体感染相关的HPV亚型,根据感染可能引起的临床后果,分为低风险亚型如HPV-2、 HPV-11、 HPV-40、HPV-42、HPV-43、HPV-44、HPV5-3、HPV-54、 HPV-61、HPV-72 和 HPV-81[3]和高风险亚型如:HPV-16、HPV-18、 HPV-31、 HPV-33,HPV-35、 HPV-39, HPV-45、 HPV-51、 HPV-52、 HPV-56、HPV-58、 HPV-59、 HPV-68、HPV-73、HPV-82 等[4]。

近年来,受到极大关注的是HPV感染与女性子宫颈癌的关系,并且经世界各国多年的大量研究,目前认识趋于统一。HPV癌基因亚型的新检测能够预测宫颈癌的未来发展风险。本文将就人乳头瘤病毒感染的常用检测方法、临床应用进展、以及感染后的干预策略进行具体分析。

一、人乳头瘤病毒感染的检测方法

HPV 的检测方法包括细胞学检测、基于聚合酶链反应(PCR)原理的实时荧光定量核酸扩增检测法(FQ-PCR)、巢式PCR、利用杂交俘获试验的基因捕获DNA 检测法(HybridenPture DNA test ,HC2)、Cervista HPV HR 检测法以及基因芯片技术[5]。目前,临床上常用的HPV检测方法主要有核酸分子杂交法、PCR-表面等离子谐振法以及将PCR 技术和反向点杂交技术相结合的检测方法(PCR-RDB,Reverse Dot Blot)。

各种检测方法原理、特点及适用范围不同,分别可用于群体筛查、辅助诊断、疗效评估,科研等不同方面。表1列出了近年常用的HPV检测方法及各自不同的特点比较。

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二、人乳头瘤病毒感染的临床应用研究进展

近年来,HPV的感染受到高度重视,在侵犯黏膜的HPV亚型中,尤其是生殖系统的HPV感染。目前发现100多种型别的HPV中有40个以上的型别与人类生殖道感染有关。

表2显示了不同HPV亚型分别对皮肤、黏膜侵犯所引致患病的风险程度。

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1974年zurHausen 首先提出,HPV通过性接触传播可导致生殖上皮非典型增生,与宫颈肿瘤有密切关系[6]。宫颈癌早期常无任何不适 ,常常在体检 、普查时被发现 ,因此临床上中晚期宫颈癌发生率较高。其中,高危型人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV-16、18亚型)感染是宫颈癌的主要危险因素[7,8]。宫颈癌的发病率和死亡率趋势显着增加,尤其是在年轻妇女中。宫颈癌已成为中国女性第二大癌症发病原因。

基于HPV检测对筛查女性子宫颈癌早期发现的重要意义,建议在健康体检中,对女性尤其是30岁以上的女性常规增加HPV分型检测,同时在30-60岁的妇女中开展定期筛查,以便早期发现、早干预、早诊断、早治疗。

对于高危型HPV感染,要同时检测HPV早期基因产物指辅助蛋白E6、E7mRNA。E6结合并灭活肿瘤抑制因子P53,E7结合并降解抑制蛋白pRb,最终导致细胞无限分裂而不发生凋亡[9] 。E6、E7基因的异常转录代表着HPV感染的持续性,当其表达失去抑制后将逐步导致宫颈癌。而HPV持续感染是宫颈癌前病变进展为宫颈癌的主要影响因素[10]。

虽然黏膜高危型HPV可能与口咽癌、扁桃体癌有关,但是不宜对这两种癌症进行HPV筛查。有研究显示,在HPV阳性口咽癌周围黏膜中很少检测到HPV16的E6mRNA[11]。

三、人乳头瘤病毒感染阳性时的干预策略

患者感染HPV后,如果长时间不能自行清除,就称为HPV的持续感染。目前普遍认为高危型HPV亚型的持续感染是发展成宫颈癌的主要因素[12]。已有的研究表明,99.7%的宫颈癌患者都能发现高危型HPV的感染,世界卫生组织和国际癌症研究中心已确认高危型HPV持续感染是宫颈癌发生的主要原因,宫颈癌是一种感染性疾病,由HPV感染到发生宫颈癌的过程需要大约8年至12年时间。

在临床诊疗中,将HPV的感染分为潜在感染、亚临床感染和临床感染三种类型:潜在感染指能检测到HPV亚型阳性,但是没有发现局部病变的迹象﹔亚临床感染时能检测到HPV亚型阳性,通过其他检查能发现肉眼看不到的感染表现,但病理学检查没有恶变的表现﹔临床感染则出现了局部病变,或病理检查发现了病变。

大多数的HPV感染在潜在感染或亚临床感染阶段即可被机体免疫力清除。对于没有病理学证实的病灶,不需要治疗的。如果增强身体抵抗力,约90%的HPV感染在2年内消退,其消退时间主要由HPV型别决定,低危型HPV需要5∼6个月,高危型HPV需要8∼24个月。

参考文献略

注:本文来源于《临床实验室》杂志2021年第2期“生化与免疫”专题

End   

题图 | veer.com   原文发布时间 | 2021年3月2日 




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