图1. 盐酸安罗替尼结合VEGFR2（A）和c-Kit（B）模式图，图中蓝色为盐酸安罗替尼，橘红色为舒尼替尼

与调控血管新生相关的主要三条信号通路之间存在着广泛的Crosstalk，各信号通路在下游的信号传递过程中可通过对ERK、Akt和PI3K等激酶的调控实现Crosstalk，这就意味着同时抑制VEGFR、PDGFR和FGFR介导的三条信号通路相比单纯抑制其中某一条信号通路而言，发生旁路激活而重新启动血管新生的可能性更低，作用更为全面。

Western Blot试验证实（图2），盐酸安罗替尼能够显著抑制VEGFR2、c-KIT、PDGFRβ等激酶的磷酸化，进而抑制其下游信号通路中ERK及Akt等激酶的磷酸化，有效阻断其相关信号通路。而对于EGFR和HER2等激酶，在相同的试验浓度（0.1-1000 nM）下，则没有观察到显著的抑制作用，说明盐酸安罗替尼对于血管形成相关受体以及c-Kit具有较强的选择性。能够特异性地结合血管新生相关的受体，有效阻断其信号传导，从而发挥抗血管生成的作用。

图2. 盐酸安罗替尼对相关信号通路及其下游信号通路的抑制作用

如图3所示，通过细胞水平及组织水平的研究发现，经过盐酸安罗替尼处理，VEGF刺激的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的增殖能力显著下降。通过划痕愈伤试验发现，由VEGF/PDGF-BB/FGF-2介导的内皮细胞发生迁移的能力也明显降低，在同个试验浓度下，盐酸安罗替尼的效果显著强于对照药物。Transwell小室试验的结果和愈伤试验一致，在VEGF、FGF及PDGF等相应细胞因子刺激下，盐酸安罗替尼均能够有效的抑制内皮细胞发生迁移，且抑制效率显著优于对照药物。

图3. 盐酸安罗替尼对新生血管的抑制作用（**P<.01）

在组织水平上（图4），大鼠动脉环和微管形成试验均发现，盐酸安罗替尼能够有效抑制新生血管的形成。大鼠动脉环试验发现，盐酸安罗替尼在10nM水平就能够有效抑制约80%的新生微血管形成；微管形成试验发现，盐酸安罗替尼能够更有效的抑制HUVEC细胞形成管状结构。从而在组织和亚组织层面证实了盐酸安罗替尼抑制血管形成的功能。

图4. 盐酸安罗替尼对新生血管的抑制作用（*P<.05,**P<.01）

通过SW620异种移植瘤模型研究发现，盐酸安罗替尼对移植瘤的抑制作用呈现明显的剂量依赖性，高剂量的盐酸安罗替尼（3mg/kg）处理后的瘤体，其体积均值仅为空白对照组的20%。观察瘤体内部发现，经过盐酸安罗替尼处理后的瘤体，其内部血管数量显著低于空白对照组，且试验组的动物并没有发生显著的体重下降。

图5. 盐酸安罗替尼小鼠移植瘤模型及瘤内血管密度

相继发表的两项机制研究证实，盐酸安罗替尼独特的分子结构决定了盐酸安罗替尼能够强烈抑制血管新生相关的VEGFR、FGFR及PDGFR所介导的下游信号通路，干预内皮细胞的增殖、迁移及形成管腔的能力，进而抑制微小血管的形成，并且能通过c-Kit激酶干预肿瘤细胞本身的多个生物学过程。动物试验发现，盐酸安罗替尼能够有效的抑制移植瘤的生长，显著降低瘤内微血管的数量。

盐酸安罗替尼，是由正大天晴药业集团自主研发的1.1类抗肿瘤新药，目前处在生产报批阶段，预计将于2018年上半年以NSCLC适应症获批上市。

盐酸安罗替尼分子结构