中医科学院青蒿素研究所最新成果：传统中药发酵冬虫夏草菌粉联合PD1抗肿瘤疗效如何？为传统中药提供了一定的循证学证据，半个月后该系列的第二篇成果刊登。

2024年4月，中国中医科学院青蒿素研究中心研究团队于《Journal of Traditional Chinese Medicine》新发表了一篇名为“Bailing capsule alleviates autoimmune thyroiditis via regulating peroxisome proliferator-activated receptor signaling pathway: a multi-omics analysis”的研究成果，通过多组学分析揭示了发酵冬虫夏草菌粉制剂（百令胶囊）在调节PPAR信号通路方面展现出的显著作用，从而有效缓解自身免疫性甲状腺炎。

自身免疫性甲状腺炎（Autoimmune thyroiditis, AIT）又称桥本甲状腺炎（Hashimoto 's thyroiditis, HT），是由高浓度的抗甲状腺抗体所引发的疾病。尽管多数桥本甲状腺炎患者最终会发展为甲状腺功能减退，但在疾病早期，其甲状腺功能往往表现正常，甚至亢进。

发酵冬虫夏草菌粉拥有抗炎、抗氧化等多重药理作用^[1,2]。临床研究显示发酵冬虫夏草菌粉制剂联用西药可显著降低HT患者TGAb、TPOAb滴度，改善甲状腺体积，且无明显不良反应，联合左甲状腺素钠可提高治疗总有效率，降低AIT患者甲状腺功能相关抗体及炎性因子水平^[3-5]。

本课题基于免疫性甲状腺炎大鼠模型，评价发酵冬虫夏草菌粉制剂的作用特点并系统性阐明其分子机制，相关结果将为百令的临床合理应用提供指导。

雄性SD大鼠，体重180-200g，随机分为空白组、模型组模型+百令胶囊低剂量、高剂量组（1 g/kg/d和5g/kg/d）。本研究采用PTg和弗氏佐剂混合免疫注射法构建AIT大鼠模型，第0天在每只大鼠后腿内侧多处皮下注射pTg乳剂（CFA）。

第1次免疫后第14天给大鼠注射pTg乳剂（IFA）进行再次免疫，联合高碘喂养。治疗组大鼠从第28天开始给药，两周后取大鼠甲状腺以及血样样本进行病理评价、免疫组化、转录组学测序、蛋白质组学分析。

一、发酵冬虫夏草菌粉能显著改善AIT大鼠甲状腺功能

高剂量百令治疗后，百令高剂量组大鼠TGAb、TPOAb、FT3、FT4水平显著降低（P <0.01）， TSH水平恢复正常（P<0.001），且HE染色结果显示，低、高剂量组使甲状腺滤泡结构更完整，滤泡大小更一致，上皮细胞排列趋于规则，间质炎性细胞浸润减少。

图1 百令对AIT大鼠体重、甲状腺功能相关抗体及激素水平和组织病理形态的影响

二、发酵冬虫夏草菌粉可显著改变AIT大鼠血清细胞因子水平

低、高剂量百令处理后，大鼠炎症状态得到改善，IFN-γ、IL-12、IL-4、IL-10水平均与对照组趋同（P <0.05，图2A）。IFN-γ/IL-4和IL-12/IL-10值显著降低（P <0.001，图2B），提示百令的抗炎作用可能是通过下调Th1细胞因子，上调Th1细胞因子IL-4和IL-10来实现的。

图2 百令对AIT大鼠血清细胞因子水平的影响

三、通过转录组学鉴定甲状腺基因表达模式的改变

甲状腺组织转录组测序分析显示，在“模型与对照组”中，1137个基因上调，988个基因下调，1137个基因稳定。“BL-high vs. Model”中上调基因348个，下调基因122个，稳定基因12627个。KEGG结果显示，AIT大鼠下调基因与百令大鼠上调基因的交集在PPAR信号通路上得分最高。

图3 甲状腺基因表达谱的变化

四、通过蛋白质组学和WB验证鉴定发酵冬虫夏草菌粉缓解AIT的关键靶蛋白

蛋白质组学结果证实了转录组结果，并提供了百令作用于AIT大鼠可能的蛋白靶点，利用String数据库进行蛋白互相作用网络分析，重点关注调控炎症的PPARs和脂肪酸代谢途径，结果显示Fabp4、Acsl1和Acadl密切相关。因此，通过检测Fabp4、Acsl1和Acadl的表达水平，进一步验证蛋白质组学和转录组学联合分析结果的准确性。

Western blot检测证实AIT大鼠甲状腺组织Fabp4蛋白表达明显下调（P <0.01）， Acsl1和Acadl显著升高（P<0.05），而冬虫夏草组则相反，这与上述生物信息学分析结果一致。

图4 百令引起的蛋白表达变化和功能通路的鉴定

本研究通过转录组学和蛋白质组学的结合分析，初步探索了发酵冬虫夏草菌粉（百令）通过PPAR信号通路调节脂肪酸代谢和改善AIT的潜在机制。

这些发现提示，百令对AIT确实具有全局调控作用，进一步扩大了其临床应用范围，为AIT的治疗提供了新的选择。

参考文献：

1.Shashidhar MG, Giridhar P, Udaya Sankar K, et al. Bioactive principles from Cordyceps sinensis: A potent food supplement - A review. J Funct Foods. 2013;5(3):1013-1030.

2.Zhou X, Gong Z, Su Y, et al. Cordyceps fungi: natural products, pharmacological functions and developmental products. J Pharm Pharmacol. 2009;61(3):279-291.

3.Tian YY, Wang N, Hu JZ. Clinical observation on Bailing capsule in treatment of Hashimoto's thyroiditis. Journal of Practical Traditional Chinese Internal Medicine. 2020;34(08):75-78.

4.Xue YH, Li CX, Shang J, et al. Effect of Bailing capsule on Hashimoto's thyroiditis. Shenzhen Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine. 2021;31(18):62-64.

5.Yang ZY. Effects of Bailing capsules combined with Levothyroxine sodium in treatment autoimmune thyroiditis. Medical Journal of Chinese People's Health. 2022;34(19):24-27.