Ziopharm是Intrexon公司和德克萨斯大学MD安德森癌症中心的全资子公司。两家公司正计划进行临床Ⅰ期试验，以评估用睡美人（Sleeping Beauty）技术制备的CAR-T细胞能否应用于复发或难治性CD19 +白血病和淋巴瘤患者。

Ziopharm研发管线（图片来源：Ziopharm官网）

该公司利用睡美人（Sleeping Beauty）技术的设计原理是在T细胞上共同表达CD19特异性嵌合抗原受体（CAR）-膜结合IL-15和一个安全开关。其产生的基因修饰的CAR +和T细胞受体（TCR +）可以靶向血液癌症中的特定抗原和实体瘤中的新抗原。该技术最大的亮点有两个，一个是是非病毒方式进行操作，提高了安全性，另外使用该技术可以“非常快速”的制备CAR-T细胞。

P-O-C mbIL15-CAR-T 原理（图片来源：ziopharam官网）

Ziopharm公司对外宣称，“睡美人”是使用公司的Point-of-care技术来设计的，缩短了制备过程，可以开发为围绕医院的分散式区域制备中心。相关项目正在与Precigen、MD Anderson癌症中心，国家癌症研究所以及德国达姆施塔特默克KGaA进行合作以推进临床试验。

公司CEO Laurence Cooper（图片来源：Ziopharm官网）

Ziopharm首席执行官Laurence Cooper在一份声明中表示：“我们知道需要准备哪些材料来解决目前面临的问题，并期待能及时回应FDA的要求。我们一直在优化我们的技术。现在，我们使用基于睡美人平台的CAR-T疗法的非病毒方法，可以在两天内非常迅速地制备出CD19-CAR-T细胞。我们相信FDA的这一反馈并不影响我们在美国国家癌症研究所（NIH）计划进行的临床试验的时间表。这表明睡美人制造的CD19-CAR-T细胞的第二阶段临床试验将继续在MD Anderson癌症中心进行。”

早期临床研究患者治疗的结果（图片来源：Ziopharm官网）

目前的嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）治疗的主流方式是需要使用基因疗法对T细胞进行修饰，并在患者体外繁殖。Ziopharm对“睡美人”的目标是消除在体外培养T细胞的需求。这将加速治疗并降低成本。公司目前运用“睡美人”技术已经有两个临床阶段计划，包括CAR-T疗法和T细胞受体（TCR）疗法。

丨“睡美人” 转座系统

“睡美人”CAR-T技术（图片来源：ziopharam官网）

“睡美人” 转座系统是Tc1/mariner 转座子超家族中的一员，她已经沉寂了一千多万年，直到1997年，Ivics等才揭示了其转座活性。转座时转座序列和转座酶，类似于“剪切粘贴”的方式，转座子载体系统转座时可携带一段外源DNA 序列，利用这一特性可以用于转基因、基因筛选及基因治疗等领域具有很好的应用前景。她能在体外培养的大多数脊椎动物的细胞中发生转座，介导外源基因的稳定整合和长期表达，可以说是除了慢病毒、逆转录病毒制备CAR-T之外的另一种非病毒的基因转染新方法。

在过去的十年中，SB转座子已经发展为非病毒载体，用于将基因引入脊椎动物的基因组中并用于基因治疗。目前已有睡美人转座子系统在体内应用、体外应用的临床前模型，而在临床试验中，睡美人基因传递系统正被广泛地用于治疗晚期B系CD19阳性急性白血病和淋巴瘤。来自病人的数据反映，基于第二代的嵌合抗原受体修饰T细胞的基因治疗对于耐药性B细胞急性淋巴细胞白血病的有效率高达90%，而对于耐药性B细胞淋巴瘤的总体有效率则高达70%。

丨Ad-RTS-hIL-12基因疗法

作用机制(图片来源 ZIOPHARM)

Ad-RTS-hIL-12是一种腺病毒载体，通过单次瘤内注射并被工程化以表达hIL-12，而hIL-12已经被证实是刺激靶向的抗肿瘤免疫应答的强大细胞因子。hIL-12的表达受RheoSwitch治疗系统(RTS)的控制，通过口服小分子veledimex(一种已被证明可穿过血脑屏障的激活剂配体)调控。

此前，Ad-RTS-hIL-12 联合veledimex在针对复发性胶质母细胞瘤(rGBM)的I期临床试验中生存获益成绩理想，被FDA授予治疗胶质瘤的孤儿药资格。